新品 | NEST细胞培养类试剂上市!打造优质细胞生长环境!
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作者:百菱生物
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发布时间: 651天前
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细胞培养是生物实验里的入门实验也是普遍要做的实验,是后续操作的基础性实验,诸如筛选药物、转染、提取蛋白(RNA)等的进展。
但基础并不代表容易,影响细胞状态的因素有很多,包括初始细胞的状态、培养基、血清、孵箱温度、CO2浓度、培养器皿等,每一个因素的都至关重要,一不小心就前功尽弃。

此文章转载自: 无锡耐思NEST
细胞培养是生物实验里的入门实验也是普遍要做的实验,是后续操作的基础性实验,诸如筛选药物、转染、提取蛋白(RNA)等的进展。
但基础并不代表容易,影响细胞状态的因素有很多,包括初始细胞的状态、培养基、血清、孵箱温度、CO2浓度、培养器皿等,每一个因素的都至关重要,一不小心就前功尽弃。
NEST 为您带来更全面的细胞培养解决方案,在原有的高品质细胞培养耗材产品线的基础上,全面上线针对于培养基(DMEM高糖培养基、RPMI1640培养基、DMEM/F-12培养基、α-MEM 培养基、McCoy's 5A培养基、Leibovitz's L-15培养基)、活力检测(细胞凋亡检测试剂盒、细胞增殖检测试剂盒)、细胞处理(抗生素/支原体清除剂、细胞消化解离试剂、细胞冻存试剂、平衡盐溶液)三大方向所使用的试剂类产品,为高等院校、研究机构、医院、CRO 及 CDMO 企业提供更全面的服务。

NEST细胞培养基人工模拟动物细胞的体内生长环境,维持体外细胞存活和增殖的营养物质基础,其主要功能是为细胞提供适宜的pH和渗透压,以及细胞本身不能合成的各种营养物质。
1. 根据细胞株的特点、实验的需要确定细胞培养基种类
细胞培养基有很多种,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是应用最广泛的培养基。其他如:M199 、 IMDM 、 L15培养基等也用于某些细胞的培养。

● D-葡萄糖(D-Glucose)
作用:细胞生长所需的主要能量来源
高糖型DMEM中的葡萄糖浓度为4.5g/L,普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产,例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。
● L-谷氨酰胺(L-glutamine)
作用:L-谷氨酰胺是一种氨基酸,细胞的重要能量来源,参与蛋白质的合成,也为合成核酸提供碳源。
存在的问题:
Ø L-谷氨酰胺不稳定,在中性的水溶液中会自发降解。
Ø 降解产物氨对细胞有毒性。
解决方案:
对氨敏感的细胞(如干细胞和原代细胞等)或培养环境(高密度反应器,无补料的长期培养)不推荐含L-谷氨酰胺的培养基,可使用前自行添加L-谷氨酰胺或选择稳定的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺作为谷氨酰胺替代物。
●丙酮酸钠(Sodium pyruvate)
作用:非必需组分,是一种能量来源。丙酮酸钠在葡萄糖不足时可以作为细胞培养中的替代碳源,保证细胞更好地生长。
● HEPES
作用:pH缓冲剂。是一种氢离子缓冲剂,其作用不依赖于二氧化碳。
在一定范围内对细胞无毒性作用,能较长时间控制恒定的pH范围,保证细胞良好生长。
部分细胞对酸碱度的变化非常敏感,建议使用含有HEPES的培养基。
●酚红(Phenol red)
作用:pH值指示剂。pH值低时培养基呈黄色,pH值高时培养基呈紫色,pH值7.2-7.4时为红色,该区间最适合细胞培养。
Ø 在一些无血清培养基的配方中酚红会干扰钠-钾平衡培养,干细胞或细胞克隆时倾向于不加酚红。
Ø 酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素),在培养激素敏感的细胞(如乳腺组织)时,建议使用不含酚红的培养基。
Ø 酚红的颜色会对流式细胞分析产生一定的干扰,不建议使用含酚红的培养基制备细胞样品。
●碳酸氢钠(Sodium bicarbonate)
作用:pH缓冲剂。pH7.2-7.4为细胞生长的最佳pH条件,多数培养基利用碳酸氢钠进行缓冲。
碳酸氢钠的缓冲需要二氧化碳。高碳酸氢钠(1.5-3.7g/L)需要5-10%二氧化碳;低碳酸氢钠(0.35g/L)不需要二氧化碳培养箱。
干粉培养基需要在配制时单独添加碳酸氢钠。

NEST® 培养基在培养细胞的细胞数和存活率方面均与进口品牌相媲美,且显微镜下细胞形态良好,长期培养细胞效果稳定,可以完美取代进口培养基。
