当前位置:
Fast Pfu DNA Polymerase (with dNTP)(Cat. No.:E031-01)

Fast Pfu DNA Polymerase (with dNTP)(Cat. No.:E031-01)

本制品是通过采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造而获得的新型Fast Pfu酶,是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶解决了高保真PCR反应中Pfu酶扩增灵敏度低、延伸速度缓慢的难题,能够高效、快速扩增≤6kb片段目的基因片段(最长可达20kb),模板低至0.05ng,并且在DNA末端补平、全基因合成、引入突变等之中有着很好的应用。

0.00
0.00
  
商品描述

本制品是通过采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造而获得的新型Fast Pfu酶,是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶解决了高保真PCR反应中Pfu酶扩增灵敏度低、延伸速度缓慢的难题,能够高效、快速扩增≤6kb片段目的基因片段(最长可达20kb),模板低至0.05ng,并且在DNA末端补平、全基因合成、引入突变等之中有着很好的应用。


产品描述
本制品是通过采用分子进化技术对普通Pfu酶进行改造而获得的新型Fast Pfu酶,是新一代的高保真DNA聚合酶。该酶解决了高保真PCR反应中Pfu酶扩增灵敏度低、延伸速度缓慢的难题,能够高效、快速扩增≤6kb片段目的基因片段(最长可达20kb),模板低至0.05ng,并且在DNA末端补平、全基因合成、引入突变等之中有着很好的应用。
产品用途
用于要求保真度比较高的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成、DNA末端补平等,也用于复杂模板,高GC/AT模板的扩增。
产品特点
  • 高保真:保真度高于Pfu酶,为普通Taq酶的50倍。

  • 快速高效:Fast Pfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍,72℃保温30秒可延伸1kb以上。扩增长度可达20kb,能高效扩增≤6kb片段。

  • 高灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出1.2kb特定基因片段,扩增性能显著优于普通Pfu酶。

  • 独特配方的5×Buffer:使PCR扩增反应更加稳定、灵敏、高效。

保存条件
-20℃。
活性定义
在74℃条件下,30分钟内催化10nmol dNTPs掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。
使用建议
  • Fast Pfu DNA聚合酶产生的PCR产物为平末端,无3´端"A"突出,除使用NovoRec® PCR一步定向克隆试剂盒(Cat. No: NR005)外,其它PCR产物的克隆方案有:

  • 1)PCR前引物进行5´端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平末端的载体中。

  • 2)将产物3´末端加A后再与T载体连接。

  • 3)由于Fast Pfu DNA聚合酶的校对活性可引起引物从3´端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为20~30mers。另外为了减少由3´→5´外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配制反应体系,并最后加入Fast Pfu DNA聚合酶。

注意事项
  • 1)对高GC含量模板,建议将变性温度提高到98℃。

  • 2)对于高GC模板,建议配套使用PCR增强剂III(Cat. No: E055),或者添加终浓度为5%-8% DMSO。

仅供科研或生产使用,不可直接应用于人体。