该磁珠适用于RNA片段快速分选和回收。磁珠经过磁性分离和乙醇清洗,低盐洗脱缓冲液或无核酸酶水洗脱的高纯度RNA片段不含有核苷酸、引物、酶和盐等污染物,可被直接用于下游应用,例如:测序、杂交、RT-PCR反应等,并可应用于手动或自动液体操作设备。
1、回收率可达80%以上;
2、操作快速简单,20min即可完成整个操作流程,无需离心。
1. RNA回收效率低或者没有?
1)RNA发生降解。操作过程要严格的确保无RNase的污染。
2)样本质量低。
3)洗脱效率低。80%乙醇需现用现配,放置时间过久,可能由于乙醇挥发,造成浓度降低,影响洗脱效果;
4)洗脱溶液孵育时间过短。磁珠应于洗脱液中按规定时间孵育,常规为5 min;
5)磁珠过度干燥。切勿室温干燥磁珠大于10 min,过度干燥将降低洗脱效率。
2. 纯化RNA中有磁珠残留?
1)磁珠分离时间过短或磁力器磁力较弱。增加分离时间或选用磁力强的磁力器,确保磁珠被磁力器全部吸附;
2)洗脱步骤中,吸取上清速度过快。缓慢吸取上清,注意切勿吸取磁珠。
3. 如何检测回收后RNA的纯度?
可以通过测定A260/A280的比值来评估。