Western Blotting即蛋白质印迹,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达信息,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
Western Blotting即蛋白质印迹,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达信息,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
技术路线:
操作步骤:
1. 蛋白样品制备及含量测定。
2. SDS-PAGE电泳。
3. 转膜及免疫反应。
4. 化学发光,显影,定影。
5. 凝胶图象分析:拍照、半定量分析
服务要求:
1. 样本要求:
1.1请您提供新鲜的且尽量多的材料:
组织样本:≥50mg;
细胞样本:≥106个;
抗凝全血样本:2-5ml。
1.2或者不低于上述质量的蛋白裂解液,我们会对蛋白裂解液进行质检,质检合格方进行正常检测。这里提醒您提前蛋白一定要加蛋白酶抑制剂(更有包括磷酸酶抑制剂)
1.3 如果是低温保存的样本,-20℃保存的样本最好不要超过2个月,-80℃保存的样本不要超过6个月,液氮保存的样本不要超过1年。如果您的样本超出上述时限,造成随后的实验失败,我们不承担责任。(当然,我们也并未肯定超出时限的样本肯定实验失败)。
2. 蛋白信息:
2.1请您提供背景资料,包括目的蛋白的分子量大小,是否膜蛋白,参考文献等.
2.2请您提供一抗(包括一抗来源、稀释倍数等),也可由我们为您代购,我们代理多个品牌的国内外抗体供您选择。