Cleavage Under Target & Tagmentation (CUT&Tag®)是一种新兴的DNA-蛋白质互作研究方法。CUT&Tag® 以融合了protein A/G 的Tn5 转座酶为核心,融合蛋白通过protein A/G 与抗体结合,使得Tn5 被栓系在靶位点周围,从而在目的位点附近进行酶切反应,并同时引入二代测序所必需的接头序列,产物DNA 经过后续提取与PCR 扩增后,得到直接用于测序的文库。CUT&Tag®与传统的ChIP-Seq 技术相比较,实验不需要超声打断,也不需要传统的连接法添加测序接头,操作简单、周期短、信噪比高、重复性好、细胞用量少,为极低起始细胞量和单细胞测序研究提供了可能性。
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NovoNGS® CUT&Tag® 3.0 High-Sensitivity Kit (for Illumina)试剂盒包含CUT&Tag® 实验中孵育抗体、转座体、构建文库的相关试剂,可以用于组蛋白修饰和转录因子的染色质结合状态研究。本试剂盒包含高活性的ChiTag® pAG-Tn5, 相较于最初版本的pA-Tn5 转座酶, pAG 结构域对兔、鼠等多种来源抗体具有广谱的强亲和性,在实验抗体的选择上具有更大的空间。
针对CUT&Tag®打断产物DNA 提取过程中小片段丢失的问题,本试剂盒提供优化的Tagment DNA Extract Beads, 相较于常规的片段分选磁珠可以完整的回收CUT&Tag® 产物中的小片段DNA, 大大简化了酚氯仿-乙醇沉淀法的繁琐操作。此外,本试剂盒还提供了阳性抗体H3K4me3(兔抗)以及相应的二抗(羊抗兔IgG) ,用于阳性对照实验(仅B 包装提供阳性抗体)。
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