重磅推荐！45分钟快速检测ELISA试剂盒（人CD59糖蛋白）
来源:菲恩生物
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作者:百菱生物
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发布时间: 6天前
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45分钟快速检测ELISA试剂盒（人CD59糖蛋白），本试剂盒采用一步法双抗体夹心技术，实现 45 min 快速定量检测人 CD59 糖蛋白。相较于传统三步法需 3-5 小时的多轮孵育与洗涤流程，本试剂盒将 “捕获抗原-检测抗体孵育-酶标二抗孵育”三步整合为一步，精简操作流程，有效降低人为误差。
CD59：膜攻击复合物抑制蛋白（MAC - inhibitory protein, MAC - IP），是一种糖基磷脂酰肌醇（GPI）锚定的细胞膜蛋白，广泛表达于几乎所有有核细胞表面，同时也以可溶性形式（sCD59）存在于血清、脑脊液、尿液等体液中。作为人类细胞中唯一的膜结合型 MAC 抑制剂，CD59 是抵御补体末端通路激活的最后防线。CD59 基因缺陷或表达缺失时，红细胞、血小板等易受补体攻击，引发阵发性睡眠性血红蛋白尿（PNH），表现为血管内溶血、血栓形成等症状；肿瘤细胞则通过异常高表达 CD59，抑制补体介导的溶瘤效应，降低免疫细胞杀伤效率，实现免疫逃逸。
造血系统来源细胞：包括 T 细胞、B 细胞、NK 细胞、单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、红细胞及血小板等，是 CD59 表达的核心群体，表达水平普遍较高。因造血细胞长期处于血液循环中，需依赖 CD59 抵御自身补体系统攻击。
非造血系统来源细胞：涵盖血管内皮细胞、上皮细胞、肝细胞、心肌细胞、肾小管上皮细胞等全身各组织器官的有核细胞，可合成 CD59 以维持局部组织微环境的补体平衡；多数肿瘤细胞（如肺癌、乳腺癌、白血病细胞）也可合成并异常高表达 CD59。
CD59由人类11号染色体（11p13）上的CD59基因编码，分子量约为18~20 kDa。其与补体 C8/C9 结合的核心位点为 Trp40、Arg53、Glu56、Asp24，这些残基构成的疏水结合口袋，是阻断 C9 聚合、抑制 MAC 组装的关键结构域。成熟 CD59 为球形单体蛋白，分子内二硫键是维持其三级结构的核心骨架。
MAC 由 C5b、C6、C7、C8、C9 五种补体蛋白逐步结合组装而成。CD59 通过结合 C8 的 β- 折叠结构域形成分子间 β- 片层，阻止 C9 插入靶细胞膜及后续的 MAC 聚合，最终发挥抑制细胞溶解的功能。
抑制补体膜攻击复合物（MAC）的形成：补体激活终末阶段形成 C5b-8 复合物，招募 C9 聚合为 MAC（C5b-9），后者嵌入细胞膜致细胞裂解。CD59 通过 Trp40、Arg53 等活性位点结合 C8α 亚基及 C9，阻断 C9 聚合与 MAC 完整组装，避免正常细胞被自身补体误伤。
调控免疫细胞活性：与 T 细胞表面 CD2、CD48 等相互作用，增强 T 细胞活化增殖及 IL-2、IFN-γ 等细胞因子分泌；抑制 NK 细胞表面补体过度激活，减少其自身损伤，维持杀伤功能。
调控炎症反应：限制补体过度激活引发的炎症级联反应，减少 TNF-α、IL-6 等促炎因子释放，避免炎症失控损伤正常组织。
维持血管稳态：血管内皮细胞表面的 CD59 可抑制补体介导的内皮损伤，减少血小板黏附与血栓形成，维持血管屏障完整。
CD59 与多种疾病相关，核心靶点为补体 C8/C9 结合域、糖基化位点及相关信号轴。其在多种癌细胞系和肿瘤组织中高表达，通过抑制补体攻击助力癌细胞免疫逃逸；研究发现，NANOG 可上调 CD59 增强肿瘤细胞对补体依赖性细胞毒性（CDC）的抵抗，靶向 CD59 能提升抗体药物疗效。
在妊娠糖尿病（GDM）中，血浆糖化 CD59（pGCD59）是敏感生物标志物，妊娠早期水平即可预测糖耐量异常及不良妊娠结局，优于传统 OGTT 检测。
| 关键靶点 | 作用机制 | 应用场景 |
| 阻断 CD59与C8/C9结合，恢复MAC细胞毒性 | |
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实验原理：本试剂盒采用一步法双抗体夹心技术，实现 45 min 快速定量检测人 CD59 糖蛋白。捕获抗体偶联了亲和标签，酶标板已预先包被能特异性识别亲和标签的抗体。实验时向各孔中加入50ul捕获-检测抗体（Cap/DetAb）工作液，然后将50ul标准品、待测样品分别加入相应孔中,混匀后37℃孵育30min。若样品中含有CD59，则会形成捕获抗体-CD59-HRP-检测抗体复合物。洗去未结合的成分后，加入TMB显色底物，TMB在辣根过氧化物酶(HRP)的催化下呈现蓝色，加反应终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长测OD值。通过绘制标准曲线计算样品中CD59的浓度。目的物质的浓度与OD450值之间呈正比。
核心优势：45min 快速定量人 CD59 糖蛋白
超短检测周期：30min完成抗原-抗体复合物孵育，15min完成底物显色，全程仅 45min，检测高效省时。
步骤精简创新：相较于传统三步法需 3-5 小时的多轮孵育与洗涤流程，本试剂盒将 “捕获抗原-检测抗体孵育-酶标二抗孵育”三步整合为一步，精简操作流程，有效降低人为误差。
结果精准稳定：缩短孵育时间，可最大限度保留样本中 CD59 蛋白的天然抗原性，减少因长时间孵育导致的蛋白降解或构象变化，保障检测结果的准确性与重复性。
显著提升实验通量：本试剂盒适用于临床批量样本筛查、科研大样本量检测等场景，可有效缩短整体实验周期，降低时间成本。
参考文献：
【1】Structural basis for membrane attack complex inhibition by CD59.
【2】Dynamics and Molecular Interactions of GPI-Anchored CD59.
【3】NANOG confers resistance to complement-dependent cytotoxicity in immune-edited tumor cells through up-regulating CD59.
【4】Plasma Glycated CD59 and Gestational Diabetes Mellitus: A Systematic Review.
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