动物造模——自身免疫性甲状腺炎(AIT)模型相关试剂及造模指南
来源:源叶生物
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作者:百菱生物
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发布时间: 1天前
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摆脱造模试剂拼凑的烦恼!源叶AIT模型试剂全程适配,涵盖化学诱导、免疫诱导、HE染色及血清检测关键环节,助您一站式快速推进甲状腺炎研究课题
自身免疫性甲状腺炎(AIT)模型相关试剂及造模指南
自身免疫性甲状腺炎(AIT)模型是研究桥本甲状腺炎等临床自身免疫性甲状腺疾病发病机制、筛选潜在治疗药物的核心实验工具。其造模核心逻辑为:通过特定诱导方式打破机体对甲状腺抗原的免疫耐受,激活自身反应性T/B淋巴细胞,使其特异性攻击甲状腺组织,最终诱导小鼠出现甲状腺滤泡破坏、淋巴细胞浸润、甲状腺自身抗体升高及甲状腺功能减退等典型病理生理特征,精准模拟临床AIT疾病进程。
目前AIT模型主要通过化学诱导或免疫干预两种方式构建,常用方法包括碘酸钠诱导法、高碘饮食诱导法及甲状腺抗原免疫诱导法。模型构建的关键在于精准控制诱导剂量、严格把控诱导周期,同时结合组织学、血清学及分子生物学多维度指标综合评估模型成功与否,源叶相关试剂可全程适配各造模环节及检测流程,助力实验高效落地。
1. 碘酸钠诱导法(化学损伤诱导)
核心原理:碘酸钠(NaIO₃)可选择性损伤甲状腺滤泡上皮细胞,破坏甲状腺组织完整性,进而引发局部炎症反应,诱导自身免疫应答启动,最终形成自身免疫性甲状腺炎。
操作:选取健康小鼠(推荐品系见注意事项),采用腹腔注射方式给予碘酸钠溶液(用生理盐水配制),注射剂量为0.5-1.5 mg/kg,连续注射3-7天,期间正常饲养,每日观察小鼠精神状态、饮食及体重变化。
优化要点:碘酸钠剂量需根据小鼠年龄、体重及品系精准调整,避免剂量过高导致甲状腺组织过度损伤,引发小鼠急性脏器衰竭;剂量过低则无法有效诱导炎症,影响模型成功率,建议造模前进行预实验优化最佳剂量。
2. 高碘饮食诱导法(生理应激诱导)
核心原理:长期高碘摄入可抑制甲状腺激素合成与分泌,干扰甲状腺正常生理功能,同时诱发甲状腺组织炎症反应,打破机体免疫耐受,逐步形成慢性自身免疫性甲状腺炎,更贴近人类临床慢性AIT的发病进程。
操作:为小鼠提供含0.05%-0.1%碘化钾(KI)的饮用水或定制高碘饲料,替代常规饮水及饲料,持续喂养4-8周,期间定期监测小鼠体重及甲状腺相关指标,确保造模稳定性。
方法特点:造模过程温和,无明显急性损伤,模型病理特征与人类桥本甲状腺炎相似度高;但造模周期较长,需严格控制饲养环境,避免碘摄入不足或过量,适合长期慢性疾病机制研究。
3. 免疫诱导法(抗原特异性诱导,推荐用于桥本氏甲状腺炎研究)
核心原理:通过皮下或腹腔注射甲状腺特异性抗原(如甲状腺球蛋白Tg、促甲状腺激素受体TSHR),配合佐剂(如弗氏佐剂)增强免疫应答,激活机体自身反应性T/B细胞,使其特异性攻击甲状腺组织,精准模拟自身免疫性甲状腺炎的发病核心机制。
操作:将甲状腺抗原(如50 μg 甲状腺球蛋白Tg)与弗氏佐剂充分混匀,制备免疫复合物;采用皮下或腹腔注射方式给予小鼠,每2周进行1次加强免疫,共免疫3次,免疫结束后继续饲养1-2周,待炎症反应充分建立后进行模型评估。
适用场景:针对性研究桥本氏甲状腺炎等自身免疫性甲状腺疾病的免疫发病机制,适配治疗药物(如免疫抑制剂)的筛选实验,模型特异性高、重复性好。
1. 组织病理学检查(核心验证指标)
造模结束后,处死小鼠并快速分离甲状腺组织,经固定、脱水、包埋、切片处理后,进行HE染色(源叶HE染色试剂盒可直接适配);显微镜下观察甲状腺组织形态,重点评估滤泡破坏程度、淋巴细胞浸润情况及组织纤维化水平,并根据炎症浸润范围及滤泡损伤程度进行分级评分(0-4级),量化甲状腺组织损伤程度,作为模型成功的核心判定依据。
2. 血清学指标检测(功能与免疫状态评估)
甲状腺功能检测:采集小鼠血清,检测血清中三碘甲状腺原氨酸(T3)、四碘甲状腺原氨酸(T4)、促甲状腺激素(TSH)水平,评估甲状腺激素分泌功能;AIT模型成功后,通常表现为T3、T4水平降低,TSH水平升高,符合临床甲状腺功能减退特征。
自身抗体检测:检测血清中抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、抗甲状腺球蛋白抗体(TgAb)滴度,二者是AIT的特征性自身抗体;模型成功后,两种抗体滴度会显著升高,可通过ELISA试剂盒(源叶适配试剂盒可直接用于检测)精准定量检测。
3. 分子生物学分析(机制研究补充)
炎症因子检测:提取甲状腺组织总RNA或总蛋白,通过qPCR或ELISA方法检测IL-6、TNF-α、IFN-γ等炎症因子的mRNA及蛋白表达水平,评估甲状腺组织炎症反应强度,为发病机制研究提供数据支撑。
免疫细胞浸润分析:采用流式细胞术分离甲状腺组织中的免疫细胞,分析T淋巴细胞、B淋巴细胞、巨噬细胞等免疫细胞的比例变化,明确自身免疫应答的激活状态,适配深度机制研究。
品系选择:优先选用C57BL/6小鼠,该品系对甲状腺炎诱导敏感性高,免疫应答稳定,是AIT造模的常用品系;需注意小鼠遗传背景一致性,避免因遗传差异导致免疫应答异质性,影响模型重复性。
剂量与周期控制:碘酸钠注射剂量、高碘饮食浓度及抗原免疫剂量需严格把控,过量易导致小鼠死亡或急性脏器损伤,剂量不足则造模失败;造模周期需根据所选方法合理调整,高碘饮食法需保证足够饲养时长,确保炎症充分建立。
饲养环境:全程维持SPF级无菌饲养条件,避免外界细菌、病毒感染干扰小鼠免疫功能及甲状腺状态;同时保证饲养环境温度、湿度稳定,饮食及饮水清洁,减少无关因素对实验结果的影响。
样本处理:组织取样、血清分离需快速规范,避免组织损伤、溶血等情况,影响后续病理染色及指标检测结果;检测试剂需严格按照说明书操作,确保检测数据精准可靠。
源叶生物可提供AIT造模全程适配试剂(碘酸钠、碘化钾、甲状腺球蛋白Tg、HE染色试剂盒等),均经过严格质控,批次稳定,助力科研人员高效完成模型构建与实验研究。
| 货号 | 商品名称 | CAS号 | 规格 |
| S24923 | 甲状腺球蛋白(来源于牛) | 9010-34-8 | 90% |
| W12579 | 碘酸钠 | 7681-55-2 | 99% |
| S30393 | 碘化钾 | 7681-11-0 | AR,99% |
| S30542 | 福氏不完全佐剂 | | BR |
| R32933 | 苏木素伊红(HE)染色试剂盒 | | |
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